浅谈单B细胞筛选技术


克隆抗体现已成为诊断治疗领域的重要研究工具。小鼠杂交瘤技术首次实现了单克隆抗抗制备,但杂交瘤技术耗时且仅限于特定的动物物种。噬菌体、酵母和哺乳动物细胞等技术已被广泛认为是增加从免疫或合成谱系中筛选的单克隆抗体的有效方法。然而,免疫反应中一些重链和轻链的体内基因的丢失,非可变区域内的无效结合,导致我们失去适合的抗体。近年来,出现了允许直接从免疫系统中采集单个B细胞库的平台。单B细胞筛选技术可以直接从免疫后的外周血中扩增出所需的抗体可变区,跳过了杂交瘤技术中的融合步骤同时通过重组抗体技术,解决了抗体生产水平低的问题。利用单B细胞分选技术卡梅德生物可以高效快速拿到客户需要的抗体,为客户后续研究提供了关键的研究工具。


背景介绍:


单B细胞技术(singleB技术)可以从免疫动物的单B细胞快速产生单抗,已被证明是获得天然抗体库的有效技术。因为B细胞有且只有一个重链可变和一个轻链可变区,且每个B细胞都能够产生高特异性抗体,通过单B抗体筛选,分离出产生抗体的单个B细胞,进而获得我们需要的单克隆抗体。

通过研究,我们知道机体经免疫刺激后,产生免疫应答,形成B淋巴细胞,经过一系列的成熟和分化后,最终形成浆细胞将IgG分泌到血液等循环系统中;而特定的某一个B淋巴细胞在经历了V-D-J重排、Class Switch和Somatic maturation之后,只含有一对编码 IgG重链和轻链的基因。因此,经过PBMC分离服务单B抗体筛选后,可以获得针对特异性抗原的单个B淋巴细胞,然后通过基因工程获得编码抗体的轻链重链基因,并进行表达验证,是目前获得单克隆抗体最有效和快速的技术。

卡梅德生物的B细胞技术的服务流程是先通过PBMC分离服务进行单B细胞分选,筛选出具体抗原结合功能的单个B淋巴细胞,接着进行单B细胞筛选,对单B细胞进行测序接着通过从中获取编码抗体重链和轻链的基因,再进行抗体测序以及重组抗体的制备,最后验证抗体表达以及进行抗体纯化。卡梅德生物的单B细胞技术(singleB技术)能够提供多种抗原作为免疫原,保证免疫动物的效价,并根据客户需要,完成多种不同种属抗体的制备,比如兔、鼠以及羊驼等。同时我们保证B细胞筛选技术生产出的抗体亲和力和特异性高,除此之外,我们还可提供许多配套的下游药物抗体开发实验。


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