常见磁珠及在液相筛选中应用

当1985年，乔治首次引入时，肽是噬菌体上唯一的分子。从那时起，噬菌体展示的应用已经扩展到包括多个抗体片段和其他免疫分子，如T细胞受体和蛋白质支架。噬菌体展示技术与使用杂交瘤方法产生抗体相关的主要瓶颈是需要使用动物宿主，导致动物来源的抗体在人体中具有高免疫原性风险。另一个考虑因素是获得抗体所需的时间，因为宿主动物的免疫接种和筛选可能。噬菌体文库筛选与合成或天然靶点的结合，一般通过基本生物淘洗对噬菌体文库筛选。噬菌体文库筛选出的物质可用于医药研发等噬菌体展示技术也可以与其他方法结合使用。

根据官能团的不同，磁珠类型自然非常的多样，羧基磁珠、甲丙酰胺基磁珠、链霉亲和素磁珠。

1、羧基磁珠

蛋白质可以通过吸附作用与羧基修饰颗粒结合，吸附是由蛋白质和颗粒表面之间的疏水和离子相互作用介导的，吸附作用发生非常迅速。除了被吸附外，蛋白质还可以共价连接到羧基修饰的颗粒表面。2、Tosyl甲苯磺酰基磁珠

甲苯磺酰基不需要活化剂预先活化，在特定的溶液中就能够与抗体产生共价结合。反应可控性强，非特异性吸附低，包被过程的重现性好，因此在批量制备磁珠的时候，批间控制更好。

2、链霉亲和素磁珠

链酶亲和素磁珠可以轻松和生物素化的生物大分子结合，实现探针的制备，或者生物大分子的分离。可以通过生物素-链霉亲和素之间的特异性结合，将抗体连接至磁珠表面。

液相筛选原理示意图

应用

利用酰胺反应与羧基化的磁珠偶联形成磁珠探针,建立一种快速、准确的噬菌体磁分离技术，可以用于样品中沙门氏菌的快速分离富集。采用纳米抗体作为靶分子进行噬菌体模拟表位多肽的淘选，并结合纳米抗体免疫磁珠作为载体。免疫磁珠富集法可以有效地富集检测对象，从而大大地降低了传统检测手段的检测限，故免疫磁珠富集技术在环境、食品中的检测领域具有极高的潜力。

磁珠富集技术可以在纳米抗体制备，噬菌体文库筛选，食源性微生物检测、药物治疗、分子及蛋白质组学的研究中得到更多应用。卡梅德生物可以通过磁珠来进行噬菌体文库筛选和纳米抗体制备等。卡梅德生物提供噬菌体抗体库开发、噬菌体展示肽库服务、噬菌体抗体库筛选服务等多种噬菌体服务。卡梅德生物还提供包括抗原制备、抗体定制、噬菌体文库构建、重组抗体纯化等全链条服务。

参考文献：

[1] Ch'ng ACW, Ahmad A, Konthur Z, Lim TS. A High-Throughput Magnetic Nanoparticle-Based Semi-Automated Antibody Phage Display Biopanning. Methods Mol Biol. 2019;1904:377-400.

[2] Källsten M, Ghorasaini M, Hartmann R, Lehmann F, Bergquist J, Kovac L, Lind SB. Magnetic Beads for Desalting of Monoclonal Antibodies and Antibody-Drug Conjugates. Anal Chem. 2020 Jul 7;92(13):9001-9007.

Ch'ng ACW, Konthur Z, Lim TS. Magnetic Nanoparticle-Based Semi-automated Panning for High-Throughput Antibody Selection. Methods Mol Biol. 2023;2702:291-313.