

单个B细胞抗体制备技术(单B细胞技术)是一种高效的抗体开发方法,旨在从个体B细胞中获取特定的单克隆抗体。这一过程能够确保获得的抗体具有高亲和力和特异性。该技术基于单细胞水平的免疫球蛋白(Ig)反应性分析,结合细胞分选或测序技术,从而获取表达抗体基因。通过体外表达,该技术能够在短时间内快速获得大量特异性单克隆抗体。由于每个B细胞只包含一个功能性重链基因和一个轻链基因序列,因此每个细胞仅能产生一种特异性抗体。
与传统的杂交瘤技术和噬菌体展示技术相比,单B细胞抗体技术具备多个优势,包括较短的开发周期、高通量、多阳性克隆及高亲和力等。最重要的是,这种技术确保了轻链和重链的天然配对,从而提高了抗体的功能性。
单B细胞技术已广泛应用于制备针对病原微生物感染的高特异性人源抗体,例如HIV抗体、破伤风抗体、乙型肝炎抗体和流感抗体等。此外,该技术在肿瘤、自身免疫性疾病和器官移植等领域也展现出独特的优势和良好的应用前景。
鼠单B细胞技术(single B)抗体制备:
卡梅德生物单B细胞单抗制备基于流式细胞分选技术,利用每个B细胞只产生一种特异性抗体的特性,直接从单个B细胞中扩增出抗体基因,通过重组表达获得特异性抗体。基于单B细胞技术,可以在完成动物免疫后直接从外周血中获取阳性B细胞并克隆抗体基因序列,得到的鼠单克隆抗体具有高特异性、高活性和高亲和力等突出优势。为了满足客户的不同需求,卡梅德生物能够提供从抗原设计,合成与修饰,到动物免疫,单B细胞富集筛选,表达与纯化,功能验证等一站式技术服务。
制备流程:

服务内容:
步骤 | 服务内容 | 交付材料 | 周期 |
动物免疫 PBMC分离 | 免疫小鼠4-5次 ELISA效价测定 外周血采集 PBMC分离 | ELISA检测结果 标准实验记录 PBMC,1×106 cells*10支 | 4-10周 可选择标准免疫或快速免疫 |
流式分选 | PBMC流式分选 | 标准实验结果记录 | 1-2个工作日 |
单B细胞 培养筛选 | 5~20板96孔板单B细胞培养和ELISA筛选 | 阳性克隆筛选结果 标准实验记录 | 2~3周 可选其他增值验证方法 |
阳性克隆测序 | 至少20个阳性克隆进行RT-PCR和测序 | RT-PCR结果 测序原始数据 特异性序列 标准实验记录 | 1周 |
载体构建 抗体表达纯化 | 哺乳表达载体构建 细胞转染 ELISA验证 | 至少3个阳性克隆序列 表达载体 纯化抗体500ug/个阳性克隆 ELISA检测结果 标准实验报告 | 5~6周 可选其他增值验证方法 |
样品要求:
客户提供 | 要求 |
重组蛋白 | * ≥2.5 mg,要求蛋白纯度>85%,蛋白要求分子量大于10 kDa,可溶性蛋白浓度在0.5~5mg/mL之间。若要求抗原亲和纯化,需额外提供10 mg左右重组蛋白 |
多肽与小分子 | * 裸肽≥10 mg,多肽纯度>90%,不少于10个AA,偶联KLH/BSA/OVA或其他载体蛋白;小分子需要预先对结构进行评估 |
服务优势:
-- 周期短
-- 不限种属
-- 可获得抗体序列
-- 得到的抗体具有更高的特异性和亲和力
-- 丰富的经验积累
-- 严格的质控体系
-- 服务可定制:提供个性化定制服务满足客户的实际需求

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