

单个B细胞技术是一种快速制备单克隆抗体的方法,结合了单细胞分离鉴定技术与多种PCR技术,形成了一套高效的体外筛选体系。该技术以单个B细胞为起点,充分利用每个B细胞只产生一种特异性抗体的特性,直接从单细胞中扩增抗体基因,从而获得针对特定抗原的异性抗体。
单个B细胞技术制备的抗体具备高通量、高效率、高稳定性和高特异性等优点,能够保留丰富的基因多样性和轻重链可变区的天然配对。其广泛应用前景使其在快速应对病原微生物抗体开发中展现出独特优势,例如在新冠病毒中和抗体的筛选中表现突出。
兔单B细胞技术抗体(single b)制备:
卡梅德生物单B细胞单抗制备(single b)基于流式细胞分选技术,利用每个B细胞只产生一种特异性抗体的特性,直接从单个B细胞中扩增出抗体基因,通过重组表达获得特异性抗体。基于单B细胞技术,可以在完成动物免疫后直接从外周血中获取阳性B细胞并克隆抗体基因序列,得到的兔单克隆抗体具有高特异性、高活性和高亲和力等突出优势。为了满足客户的不同需求,卡梅德生物能够提供从抗原设计,合成与修饰,到动物免疫,单B细胞富集筛选,表达与纯化,功能验证等一站式技术服务。
制备流程:

服务内容:
步骤 | 服务内容 | 交付材料 | 周期 |
动物免疫 PBMC分离 | 免疫兔子4-5次 ELISA效价测定 外周血采集 PBMC分离 | ELISA检测结果 标准实验记录 PBMC,1×106 cells*10支 | 4-10周 可选择标准免疫或快速免疫 |
流式分选 | PBMC流式分选 | 标准实验结果记录 | 1-2个工作日 |
单B细胞 培养筛选 | 5~20板96孔板单B细胞培养和ELISA筛选 | 阳性克隆筛选结果 标准实验记录 | 2~3周 可选其他增值验证方法 |
阳性克隆测序 | 至少20个阳性克隆进行RT-PCR和测序 | RT-PCR结果 测序原始数据 特异性序列 标准实验记录 | 1周 |
载体构建 抗体表达纯化 | 哺乳表达载体构建 细胞转染 ELISA验证 | 至少3个阳性克隆序列 表达载体 纯化抗体500ug/个阳性克隆 ELISA检测结果 标准实验报告 | 5~6周 可选其他增值验证方法 |
单B细胞单抗制备优势:
类目 | 单B细胞技术(single b) | 杂交瘤技术 | 噬菌体展示技术 |
抗体 | 天然 | 天然 | 非天然 |
抗体亲和力 | 高 | 高 | 中等 |
可成药性 | 高 | 高 | 低 |
时间 | 16~20周,可选快速免疫 | 20~26周,可选快速免疫 | 16~20周,可选快速免疫 |
抗体基因序列 | 直接获得 | 需要进一步测序 | 直接获得 |
抗体多样性 | 高 | 中等 | 中等 |
所能筛选的种属 | 不限种属 | 鼠、兔 | 不限种属 |
样品要求:
客户提供 | 要求 |
重组蛋白 | * ≥2.5 mg,要求蛋白纯度>85%,蛋白要求分子量大于10 kDa,可溶性蛋白浓度在0.5~5mg/mL之间。若要求抗原亲和纯化,需额外提供10 mg左右重组蛋白 |
多肽与小分子 | * 裸肽≥10 mg,多肽纯度>90%,不少于10个AA,偶联KLH/BSA/OVA或其他载体蛋白;小分子需要预先对结构进行评估 |
服务优势:
-- 周期短
-- 不限种属
-- 可获得抗体序列
-- 得到的抗体具有更高的特异性和亲和力
-- 丰富的经验积累
-- 严格的质控体系
-- 服务可定制:提供个性化定制服务满足客户的实际需求

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